SBE, Doktora, Doğum ve Jinekoloji (Vet) KoleksiyonuDoğum ve Jinekoloji (Vet) Anabilim Dalı'nda yapılan doktora tezleri bu koleksiyon altında listelenir.http://hdl.handle.net/123456789/12412024-03-28T21:41:24Z2024-03-28T21:41:24ZSiklik ve erken gebe kısrak endometriumlarında WNT (Wıngless Types) genlerinin ekspresyonunun araştırılmasıAtlı, Mehmet Osmanhttp://hdl.handle.net/123456789/80292018-01-24T00:01:45Z2009-01-01T00:00:00ZSiklik ve erken gebe kısrak endometriumlarında WNT (Wıngless Types) genlerinin ekspresyonunun araştırılması
Atlı, Mehmet Osman
Wnt genlerinin bir çok türde reprodüktif olayların düzenlenmesinde önemli rollerinin olduğu bilinmektedir. Fakat Wnt genleri kısrak endometriumunda henüz karakterize edilmemiştir. Bu çalışmanın amacı siklik kısraklarda siklusun ovulasyon günü (0. gün) geç diöstrus ve luteolizis sonrası östrus ile birlikte gebeliğin 15., 18. ve 22. günlerinde Wnt sinyal iletim sistemine ait genlerin ekspresyon seviyelerinin mRNA düzeyinde belirlenmesidir. Bu amaç için yukarıda bahsedilen her bir gün için 4'er adet olacak şekilde reprodüktif yönden sağlıklı kısraklardan biyopsi örnekleri toplanmıştır. Siklusun günleri kan progesteron düzeyi ve ultrasonografi ile tespit edilmiştir. Ayrıca gebeliklerin teşhisinde de utrasonografiden yararlanılmıştır. Toplanan biyopsi örneklerinden total RNA izole edilerek RT reaksiyonu ile cDNA'ya çevrilmiştir. Kısrak endometriumda PZR ile 17 Wnt geni içinden Wnt2, Wnt2b, Wnt4, Wnt5a, Wnt5b Wnt7a, Wnt8a, Wnt9b, Wnt10b, Wnt11, Wnt16, Wnt sinyal iletim sistemi antagonistlerinden SFRP1, SFRP2, SFRP5, Dkk1, Dkk2, Wif-1, hücre yüzey reseptörü FZD6 ve LRP6, intrasitoplazmik kompanentlerden DVL-2, GSK3-beta, Beta-catenin, nükleer faktör Lef-1 ve Wnt genlerinin aktive ettiği Myc ile MSX2 genlerinin endometriumda siklik ve gebe günlerin tamamında ekspresyon tespit edildi. Real-time PZR ile bu genlerin siklik ve gebe günlerdeki ekspresyon farklılıkları araştırılmıştır. Normalize edilmiş data mixed model ANOVA kullanılarak analiz edildi ve gruplar arası farkların belirlenmesi için least significant difference test kullanıldı. Siklus günleri içerisinde Wnt2b, Wnt5a, Wnt9b, Wnt10b, Wnt11, Wnt16, Dkk1, Wif-1 ve Myc genlerinin geç diöstrus döneminde miktarları önemli ölçüde artmıştır (P<0,05). Wnt7a ve SFRP1 geç diöstrus döneminde baskılanmıştır (P<0,05). Wnt5b ekspresyonu geç diöstus ve luteolizis sonrası östrusta ovulasyona göre azalmıştır (P<0,05). Wnt4 ve Lef-1 ise sadece luteolizis sonrası östrusta artmıştır (P<0,05). Erken gebelikte ovulasyon günü ile kıyaslandığından Wnt2, Wnt5b, Wnt7a ve SFRP1 gebelik günleri içerisinde baskılanmıştır (P<0,05). Non-canonical Wnt5a, Wnt11 ile antagonist Wif-1'in ekspresyonu gebeliğin 15. ve 18. günlerinde artmıştır (P<0,05). Wnt2b ise sadece gebeliğin 15. gününde artmıştır (P<0,05). Dkk1'in gebelik süresince ekspresyonu artmıştır (P<0,05). Wnt16 ise erken gebelik boyunca artış eğilimindedir (P<0,09). Siklusun geç diöstrus dönemi ile gebeliğin 15. günü kıyaslandığında, Wnt8a (P<0,05) ve Myc (P<0,08 ) gebeliğin 15. gününde baskılanmış, Wnt4'ün ekspresyonu artmıştır (P<0,06). Luteolizis sonrası östrus ile 18. gün gebelik kıyaslandığında Wnt7a, SFRP1, Lef -1 baskılanmış, Dkk1, Wif-1 ve MSX2 genleri ise aynı dönemde ekspresyonları artış göstermiştir (P<0,05). Aynı karşılaştırma günlerinde Wnt5a ve Wnt16 gebeliğin 18. gününde artış eğilimindedir (P<0,09). Sonuç olarak; Wnt gen ailesi ve bunlara ait sinyal iletim sistemi kompanentleri ilk defa kısrak endometriumunda karakterize edilmiştir. Elde edilen verilere bakıldığında östrus esnasında bu genlerden bazılarının ekspresyonunun maternal hormonların etkisi ile değiştiği söylenebilir. Benzer bir şekilde erken gebeliğin bu genlerin ekspresyonunu düzenlediğinin gösterilmesi, Wnt genlerinin daha henüz uterus içerisine implante olmayan embriyonun büyüyüp gelişmesi için erken gebelik boyunca endometriumda proliferasyon ve sekresyon fonksiyonlarının düzenlenmesinde rol oynayabileceğini göstermektedir; Wnt genes have important roles in reproductive events of many species. To our knowledge, there is no data concerning the Wnt family genes expression in equine endometrium. The objective was to characterize Wnt genes in equine endometrium in different stages of estrous cycle and early pregnancy. Expression of Wnt genes and their steady state mRNA levels were evaluated from endometrial biopsy samples of reproductively sound mares on day of ovulation (d0, n=4), late diestrus (LD, n=4) and after luteolysis in estrus phase (AL, n=4) of the estrous cycle. The stages of estrous cycle were confirmed by plasma progesterone concentrations measured daily and ultrasound examinations. Also, on days 15 (P15), 18 (P18) and 22 (P22) of early pregnancy, biopsy samples were collected (n=4 for each day). Pregnancies were confirmed by ultrasonography. Total RNA was extracted and converted to cDNA by using Reverse Transcriptase reaction. PCR amplifications showed that out of 17 Wnt genes, Wnt2, Wnt2b, Wnt4, Wnt5a, Wnt5b, Wnt7a, Wnt8a, Wnt9b, Wnt10b, Wnt11 and Wnt16 were present in the endometrium in all stages of estrous cycle and pregnancy. Also, Wnt antagonists SFRP1, SFRP2, SFRP5, Dkk1, Dkk2, Wif-1, cell membrane receptors FZD6 and LRP6, cytoplasmic DVL-2, GSK3-beta, Beta-catenin, nuclear transcription factor Lef-1 and Wnt target genes Myc and MSX2 expressions were observed in both cyclic and early pregnant endometrium. Relative quantifications were made by Real time-PCR. A mixed model of ANOVA was fitted on the normalized data and least significant difference test was employed to determine significantly different groups. Wnt2b, Wnt5a, Wnt9b, Wnt10b, Wnt11, Wnt16, Dkk1, Wif-1 and Myc were upregulated in LD compared to d0 and AL (P<0.05). Wnt7a and SFRP1 expressions were downregulated in LD (P<0.05). Wnt5b expression was attenuated in both LD and AL compared to d0 (P<0.05). Wnt4 and Lef-1 expressions were only upregulated in AL compared to d0 and LD (P<0.05). In early pregnancy, Wnt2, Wnt5b, Wnt7a ve SFRP1 expression were downregulated compared to d0 (P<0.05). Non-canonical Wnt5a, Wnt11 and antagonist Wif-1 were upregulated on days P15 and P18 (P<0.05). Wnt2b only increased on day P15 (P<0.05). Pregnancy increased the amount of Dkk1 (P<0.05). During the early pregnancy, increase in Wnt16 expression was slightly significant (P<0,09). Compared to LD, Wnt8a (P<0.05) and Myc (P<0.08) decreased on P15, while Wnt4 was upregulated (P<0.06). When AL and P18 were compared, Wnt7a, SFRP1, Lef-1 expressions were downregulated while Dkk1, Wif-1 ve MSX2 were upregulated (P<0.05). Also, in the same comparison days, Wnt5a and Wnt16 tended to be upregulated on day P18 (P<0.09). In conclusion, Wnt genes, their antagonists and their associated signal transduction components were, the first time, characterized in equine endometrium. Some of Wnt genes were regulated by the maternal hormones during the estrous cycle. Similarly, these genes also seem to be regulated during early pregnancy, therefore it can be suggested that regulation of some Wnt genes in endometrium may be mediating the endometrial proliferative and secretory functions to support the growth and nourishment of unattached embryo in uterus during early pregnancy.
2009-01-01T00:00:00Zİsviçre esmeri düve ve laktasyonda olmayan ineklerde ovaryum fonksiyonlarının östrüs senkronizasyonu ve gebelik oranı üzerine etkisiKöse, Mehmethttp://hdl.handle.net/123456789/71142017-12-15T00:01:58Z2010-01-01T00:00:00Zİsviçre esmeri düve ve laktasyonda olmayan ineklerde ovaryum fonksiyonlarının östrüs senkronizasyonu ve gebelik oranı üzerine etkisi
Köse, Mehmet
Bu çalışmada, laktasyonda olmayan İsviçre Esmeri inek ve düvelerde ovaryum fonksiyonlarının östrüs senkronizasyonu ve gebelik oranı üzerine olan etkisi araştırıldı. Çalışmada materyal olarak toplam 87 baş inek ve düve (27 baş laktasyonda olmayan inek, 60 baş düve) kullanıldı. Hayvanların tamamına 14 gün ara ile iki kez PGF2? ve ikinci PGF2? enjeksiyonundan 48 saat sonra GnRH enjeksiyonu uygulandı. GnRH enjeksiyonunu izleyen 16-20. saatlerde hayvanlar sabit zamanlı olarak tohumlandı. Ovaryum fonksiyonlarının izlenmesi amacıyla hayvanların kuyruk venasından PGF2? enjeksiyonlarının yapıldığı günler, tohumlama zamanı ve tohumlama sonrası 7, 14, ve 21. günlerde kan örnekleri alındı ve progesteron düzeyleri belirlendi. Progesteron düzeylerine göre ovaryum fonksiyonlarını ifade eden dört alt grup oluşturuldu. Gebelik tanısı tohumlamayı izleyen 28. günde ultrasonografik muayene ile yapıldı. Uygulanan senkronizasyonda başarıyı etkileyen en önemli faktörün, ikinci PGF2? enjeksiyon gününde ovaryumlarda luteal yapının bulunmaması (% 6.89) olduğu belirlendi. Senkronize hayvanlarda ise gebelik oranını etkileyen en önemli faktörlerin ise tohumlama sonrası 7. günde luteal fonksiyonun başlamaması (n=9; %11.84) ve erken embriyonik ölümlerin (n=9; %11.84) olduğu belirlendi. Uygulanan senkronizasyon protokolü sonrası gebe kalma/gebelik oranı inek ve düvelerde sırasıyla % 36.67 ve % 37.04 olarak belirlendi (p>0.05). Sonuç olarak uygulanan senkronizasyon protokolüyle ovulasyonlarında yüksek oranda senkronize edilebileceği ve östrüs gözlemi yapılmadan 16-20. saatler arasında sabit zamanlı tohumlama ile tatminkar gebelik oranı elde edilebileceği kanısına varıldı.; In this study, the effect of ovarian functions on estrus synchronization and pregnancy rates in Brown Swiss Heifers and Non-Lactating Cows was investigated. In study, Brown Swiss cows (n=27) and Brown Swiss heifers (n=60) was used as material. All animals were injected by two intramuskuler injections of 500 mcg cloprostenol administered 14 days apart and, was injected GnRH 48 h after second PGF2? injection. Timed artificial inseminations were performed between 16-20 hours following this injection. To define ovarian function was collected blood samples by tail venipuncture at on days applied PGF2?, insemination day, 7, 14, and 21 after insemination and, progesterone levels were determined. According to progesterone levels, four sub-groups were conducted. Pregnancy examinations were performed on days 28 after the AI by ultrasonography. The most important factor reducing the efficacy of used estrus synchronization was did not have luteal function (6,89 %) at the second PGF2? administration. Pregnancy rates in synchronized cows was affected by lack formation of luteal tissue on ovarium until on day 7 after insemination (n=9; 11,84%) and early embryo losses (n=9; 11,84%). Pregnancy rates in cows and heifers were 37.4%; 36,67 on days 28 respectively (P>0.05). In conclusion, it was concluded that synchronization protocol used in our study can be synchronized ovulations and can be gained optimal pregnancy rates with fixed-time insemination without estrous detection.
2010-01-01T00:00:00ZAkkaraman ırkı koyunlara FSH uygulaması sonucu elde edilen süperovulasyon cevabının değerlendirilmesiKayaalp, Ergünhttp://hdl.handle.net/123456789/66362018-05-31T06:20:13Z2010-01-01T00:00:00ZAkkaraman ırkı koyunlara FSH uygulaması sonucu elde edilen süperovulasyon cevabının değerlendirilmesi
Kayaalp, Ergün
Bu çalışma azalan dozlarda P-FSH ile follikül gelişimi uyarılan Akkaraman Irkı koyunların süperovulasyon cevabının değerlendirilmesi amacıyla yapıldı. Çalışmada 15 Akkaraman Irkı koyun ve 15 Akkaraman Irkı koç kullanıldı. Koyunları senkronize etmek için 20 mg Fluorogestone Asetat (FGA) içeren vaginal sponjlar (Choronogest® CR, Intervet) 14 gün boyunca uygulandı. Süperovulasyon amacıyla koyunlara 12. günde 12 saat arayla (08:00-20:00) sabah-akşam 4 gün boyunca azalan dozlarda (1.5ml x 3, 1.25ml x 2, 1ml x 3) P-FSH (Folltropin®-V, BIOICHE) uygulandı.On beşinci günün sabahında sponj uzaklaştırıldı. On altıncı günde bir koyuna bir koç olacak şekilde koç katımı yapıldı. Koç koyunu aştıktan sonra koyuna 1ml GnRH analoğu (Receptal®, Intervet) yapıldı. Östrüsten 7 gün sonra koyunlar Mid-ventral laparatomi yöntemiyle açıldı. Çalışma sonucunda %80 östrüs, %53.33 süperovulasyon, %64.5 hücre toplama oranı, %67.35 fertilizasyon, 9.5±2.83 CL, 4.13±1.04 toplam embriyo, 3.25±0.64 dondurulabilir embriyo, 2.0±1.73oosit, 0.5±0.5 dejenere embriyo, 2.13±0.79 morula, 0.36±0.18 kompakt morula, 0.13±0.13 erken blastosist, 0.63±0.42 blastosist ve 0.38±0.37 hatched blastosist elde edildi. Sonuç olarak spesifik bir koyun ırkı için geliştirilecek olan güvenilir bir süperovulasyon protokolünün yapılacak çalışmaların başarı oranını arttıracağı kanısına varıldı.; In this study, aim was to evaluate the superovulation response of Akkaraman ewes when follicle development was stimulated by FSH. Total of 15 Akkaraman rams and 15 sheep were used. For synchronizzation, vaginal sponges containing 20 mg Fluorogestone Acetat (FGA, Choronogest CR, Intervet) were applied (day 0) for 14 days in ewes. Starting on day 12, decreasing doses of P-FSH (Folltropin®-V, BIOICHE, 1.5ml x 3, 1.25ml x 2, 1ml x 3) was administrated to the ewes for induction of superovulation for 4 days with 12 hour intervals. In the morning of day 15, sponges were removed and ewes were placed together with a ram (one ram for one ewe). After mating, ewes were injected with GnRH (Receptal®, Intervet, 0.0042 mg/ml). Ewes were underwent surgery with mid-vetral opening 7 days after oestrus and uterus hornes were washed separately.Twelve ewes displayed oestrus and therefore, oestrus rate was determined as 80%. As the result of washing, superovulation response was 53.3 %. 9.5±2.83 CL, 64.5% total cell rate, 4.13±1.04 total embryo number, 3.25±0.64 freezable embryo, 67.35% fertilization rate, 2 ±1.73 Oosit, 0.5±0.5 degenerate embryo, 2.13±0.79 Morula, 0.36±0.18 compact morula, 0.13±0.13 early blastosist, 0.63±0.42 blastosist and 0.38±0.37 hatched blastosist were obtained per ewe. Consequently, these results indicate that a reliable superovulation protocol needs to be developed for a particular breed of ewe to increase the success rate of the further studies.
2010-01-01T00:00:00Zİneklerde gebeliğin erken dönemlerinde oluşan mastitislerin gebeliğin sürdürülmesi üzerine etkisi ve tespit edilen etkenlerin antibiyotik duyarlılıklarının araştırılmasıAyanaoğlu, Kağanhttp://hdl.handle.net/123456789/55152017-08-09T00:03:12Z2012-01-01T00:00:00Zİneklerde gebeliğin erken dönemlerinde oluşan mastitislerin gebeliğin sürdürülmesi üzerine etkisi ve tespit edilen etkenlerin antibiyotik duyarlılıklarının araştırılması
Ayanaoğlu, Kağan
Bu çalışmada modifiye ovsynch senkronizasyon programı uygulanarak senkronize edilen ineklerde, mümkün olduğunca diğer olumsuz faktörleri ortadan kaldırarak, mastitisin gebelik üzerindeki etkisini araştırmak amaçlandı. Çalışmada materyal olarak, yaşları 2 ? 4 olan ve reprodüktif problemi olmayan, dengeli ve yeterli rasyon ile beslenen, açık sistemde yetiştirilen ve günde iki kez sağım uygulanan 150 adet Holstayn ırkı inek kullanıldı. Çalışmaya alınan hayvanlar, postpartum 40 ? 80. günler arasında idi. Bu hayvanlar senkronize edildi ve daha sonra tohumlandı. İneklerin gebelikleri, tohumlama sonrası 30. günde ultrason ile teşhis edildi. Bu muayene sonrası 102 baş ineğin gebe olduğu belirlendi ve izleyen muayeneler gebe olan ineklerde gerçekleştirildi. Gebe guruplar her 20 günde bir rektal muayene ile gebeliğin devamlılığının takibi amacıyla kontrol edildi. Gebe hayvanlar 20 gün ara ile mastitis yönünden kontrol edildi. Gebelik sağlandıktan sonra kontrol süresi 3 ay olarak uygulandı. İlk muayenede gebe olan ineklerin süt numunelerinin kontrollerinde 30. günde %1, 50. günde %10, 70. günde %11 ve 90. günde %1 mastitis olgusu tespit edildi. Gebelik oranları incelendiğinde, 30. gündeki muayenede %100 (çalışmaya başlanılan ineklerin tamamı), 50. gündeki muayenede %98, 70. gündeki muayenede %94 ve 90. gündeki muayenede %94 oranlarında gebeliğin sürdüğü tespit edildi. Çalışmada, 23 mastitisli ineğe ait sütlerin mikrobiyolojik incelenmesinde 30 (%90,9) örnekten bakteriyel etken izole edilirken, 3 (% 9,1) örnekten herhangi bir bakteriyel etken izolasyonu yapılamadı. Mastitisli sütlerin 22'sinde stafilokok (Staf. aureus + KNS), 3'ünde streptokoklar ve 5'inde enterobakterler izole edildi. Çalışılan numunelerin antibiyotik duyarlılık sonuçları incelendiğinde, ß-laktam grubu antibiyotiklerle yapılan deneylerde 22 stafilokok suşunun 9'unun (% 40,91) Amoksisiline, 1'inin (% 4,55) Amoksisilin-Klavulonik asite, 14'ünün (%63,64) Penisiline, 3'ünün (%13,64) Enrofloksasiline dirençli ve ayrıca suşlarının tamamının Vankomisine duyarlı olduğu belirlendi. Sonuç olarak, yapılan bu çalışmada, gebeliğin ilk 45 günlük döneminde (embriyonal dönem) mastitisin gebe kalma oranına istatistiksel olarak anlam ifade edecek bir etkisinin olmadığı (p>0,05), bununla birlikte fötal dönemde (Gebeliğin 45 günden sonraki dönemi) oluşan mastitisin gebeliğin korunması üzerine olumsuz etkisinin olduğu (p<0,002) ve 22 inekten 5 tanesinde (%22,72) gebeliğin devam etmediği tespit edildi. Sunulan çalışmada, embriyonik dönemde oluşan mastitisin gebeliğin sürdürülmesi üzerine olumsuz etkisinin olduğu kanısına varılmıştır (p<0,002).; In this study, on the cows that were synchronized by appliying ovsynch synchronization program, by eliminating the other negative factors as far as possible, we aimed to examine the effect of mastitis on pregnancy. In the study, as the material, 150 Holstein breed of cows were used, those were between ages 2 to 4 and have non-reproductive problems, fed with a balanced and adequate diet, grown in open-system and made twice a day milking. These animals which taken to study were between 40-80 post partum days. The animals were synchronized and inseminated later. Pregnancy of cows were diagnosed by ultrasound after 30th day of insemination. After this diagnose we determined 102 pregnant cows and following diagnoses were done on these pregnant cows. 30. day of pregnancy was checked by ultrasound. In order to follow the continuity of pregnancy, pregnant cows were controlled by rectal examination after every 20 days. Pregnant animals were checked for mastitis after each 20 days. After providing the duration of pregnancy, 3 months were controls. In the control of pregnant cows? milk, mastitis cases were determined as 1% after 30th day, 10% after 50th day, 11% after 70th day, 1% after 90th day. When the rate of pregnancy were examined, the continuity of pregnancy rate was obtained as 100% after 30th day, 98% after 50th day, 94% after 70th day and 94% after 90th day. In this study, in the microbiological examination of milk, which are belong to 23 cows with mastitis, while isolating bacterial factor from 30(90.9%) samples, any bacterial factor isolation couldn?t be done from 3(9.1%) samples. In the 22 of mastitis milks stafilokok (Staf. aureus +KNS), in the three streptokoks and in the 5 enterobacter were isolated. When the antibiotic susceptibility results of studied samples were examined, in the experiments, which done by B* laktam group antibiotics, 9(40,91%) of 22 staphylococci strains resistant to Amoxicillin 1(4,55%) of them resistant to Amoxicillin-Clavulanate acid, 14(63,64) of them resistant to Penicilin, 3(13,64) resistant to Enrofloksasill, besides we determined that all strains were sensitive to Vancomycin. As a result, in this study we can see that, in the first 45 days of pregnancy, (the embryonic period) mastitis doesn?t have statistically meaningful effect to the pregnancy rate(p>0.05), in edition to this, in the fetal period (a period of pregnancy after 45 days) mastitis has negative impact on the protection and continuity of pregnancy and in the 5 of 22 cows (22,72%) non-continuing pregnancy was detected. In the presented study, those results was concluded; mastitis of the embryonic period may have negative impact upon the continuity of pregnancy.(p<0,002).
2012-01-01T00:00:00Z